Xác định hàm lượng Casein thông qua phương pháp Kjeldahl nhằm xác định hàm lượng nitơ phi protein. Đây là các chất được quan tâm lớn đến những chất, cả trong lĩnh vực dinh dưỡng và ứng dụng công nghệ. Protein casein là một họ protein liên quan đến sản xuất pho mát và sữa lên men.
Đây là những hợp chất nitơ rất quan trọng trong quá trình sản phẩm sữa sản xuất, đồng thời cũng là chất phụ gia trong y học, và chúng có công dụng kỹ thuật trong mỹ phẩm, sơn và chất kết dính. Để xác định hàm lượng Casein sẽ dựa vào sự khác biệt giữa hàm lượng nitơ tổng số (Ntot) và nitơ phi casein (NCN).

Nội Dung Bài Viết
Xác định hàm lượng Casein trong sữa bằng phương pháp Kjeldahl
- Phương pháp xác định hàm lượng casein bằng phương pháp Kjeldahl cũng là phương thức được sử dụng nhiều nhất để xác định hàm lượng nitơ và protein trong thực phẩm và thức ăn chăn nuôi, với ưu điểm về độ chính xác và khả năng tái tạo và ứng dụng đơn giản của nó.
- Đây là một phương pháp hiện đại trong quá trình khoáng hóa được hỗ trợ xúc tác của vật liệu hữu cơ trong một hỗn hợp sôi của axit sulfuric và muối sunfat khi phân hủy nhiệt độ cao hơn 400 ° C.
- Nitơ liên kết hữu cơ được chuyển thành amoni sunfat. Kiềm hóa dung dịch đã tiêu hóa giải phóng amoniac được chưng cất định lượng bằng hơi nước và xác định bằng phương pháp chuẩn độ.
Mẫu dùng thử nghiệm
Mẫu sữa bò chất lượng cao dạng lỏng, Protein nguyên chất và tiệt trùng với giá trị được dán nhãn: 3,35 g / 100 ml, hàm lượng casein từ tài liệu: 2,66%
Hóa chất dùng để tách và lọc
- Sử dụng dung dịch axit axetic nồng độ 10% – 10 ml axit axetic pha loãng thành 100 ml bằng nước khử ion
- Dung dịch natri axetat 1M – 8,2 g natri axetat pha loãng thành 100 ml bằng nước khử ion
- Giấy lọc không chứa nitơ, lọc tốc độ cao
Quy trình thực hiện
Quy trình thực hiện thí nghiệm xác định NCN trong sữa bao gồm các bước sau:
– Khuấy sữa vào cốc bằng máy khuấy từ VELP trong 60 giây với tốc độ 700 vòng / phút.
– Kết tủa cazein và lọc
– Phân hủy dịch lọc bằng DKL 20
– Chưng cất và chuẩn độ mẫu bằng UDK 159
– Tính toán (xem các công thức sau)
– Cho 20 ml sữa đã được điều nhiệt trước đó ở 20 ° C vào bình định mức 50 ml với 20 ml nước khử ion. Sau đó, đặt bình ở 37 ° C trong Bể tuần hoàn mở trong 30 phút.
– Sau khoảng thời gian này, thêm 2 ml dung dịch axit axetic (10%), lắc đều và để yên trong khoảng 10 phút.
– Thêm 2 ml dung dịch natri axetat 1M, để hỗn hợp nguội xuống 20 ° C và đổ đầy nước khử ion đến vạch hiệu chuẩn.
– Sau đó, lọc qua một bộ lọc giấy và thu toàn bộ dịch lọc.
Tiêu hóa mẫu
Dùng pipet cho 20 ml dịch lọc vào ống nghiệm 250 ml Trong mỗi ống nghiệm thêm:
- 2 viên xúc tác VCM
- 4 viên chống tạo bọt VS
- 15 ml axit sulfuric đậm đặc từ 96-98%
- 5 ml hydrogen peroxide (~ 30%)
- Chuẩn bị một số mẫu trắng với tất cả các hóa chất và không có mẫu.
Kết nối Bộ phá mẫu cùng với Máy bơm hút và Hệ thống trung hòa khói để trung hòa khói axit tạo ra trong giai đoạn phân hủy.
Tiêu hóa các mẫu, thiết lập các độ dốc sau trong “Phương pháp có thể tùy chỉnh”: trong 15 phút ở 150 ° C cộng với 45 phút ở 200 ° C cộng với 15 phút ở 300 ° C và 60 phút ở 420 ° C
Chưng cất và chuẩn độ
Tiếp đến để nguội ống nghiệm đến 50-60 ° C.
Bảo dưỡng thiết bị UDK 159 bằng cách thực hiện Kiểm tra Tự động trong Hệ thống Menu và Rửa sạch.
Chưng cất các mẫu theo phương pháp xác định trước n ° 1:
- H2O (nước pha loãng): 50 ml
- H2SO4 (0,1 N) làm dung dịch chuẩn độ
- NaOH (32%): 70 ml
- Yếu tố protein: 6,38
- H3BO3 (4% với chất chỉ thị): 30 ml
Trong cài đặt UDK 159, đặt làm đơn vị đo mgN và% N cho kết quả cuối cùng và làm lượng mẫu “ml”. Thời gian phân tích chưng cất & chuẩn độ: từ 4 phút cho một lần thử.
Kết quả:
Kết quả của nitơ phi casein (NCN) được tính theo phần trăm nitơ, sử dụng làm lượng mẫu thể tích dịch lọc (V dịch lọc) nhân với 0,4. Chúng dựa trên công thức sau:
NCN% = mg N / [(G milk/V sol) x 1000 x V filtrate] x 100
G sữa = trọng lượng sữa (20 g)
V sol = dung dịch sữa chứa tất cả các hóa chất cần thiết để tách, được làm đầy đến thể tích (50 ml)
V lọc = dịch lọc được sử dụng để thực hiện 1 phân tích (ml)
Sau đó kết quả thu được đã được xuất và nhân với hệ số hiệu chỉnh sữa nguyên chất là 0,994 (đối với sữa bán gầy sữa, hệ số hiệu chỉnh là 0,998). Casein được tính toán có tính đến tổng hàm lượng nitơ đo được (Ntot) của 0,525% trong sữa nguyên chất. (Đối với Ntot, xem Ghi chú Ứng dụng “Xác định N / Protein trong sữa theo phương pháp Kjeldahl”)
Casein% = 6.38 x (%Ntot – %NCN)

Quy trình hoàn chỉnh đã được xác minh bằng cách sử dụng 5 ml dung dịch tiêu chuẩn glycine (3%) chứa 28 mg nitơ, như chất đối chiếu. Sự phục hồi thu được rơi vào phạm vi dự kiến: từ 98% đến 102%.
Xem thêm: Thiết bị trích béo bằng phương pháp Kjeldahl
Bài viết liên quan
Sự Thử Va Đập Charpy
Sự thử va đập Charpy còn được gọi là sự thử khắc-V Charpy là phép ...
Th7
Phương Pháp Đo Độ Nhớt Chất Lỏng
Nội Dung Bài Viết Đinh nghĩa độ nhớt chất lỏng ?Những yếu tố ảnh hưởng ...
Th7
Tìm Hiểu Về Phương Pháp Chưng Cất Đạm Kjeldahl
Nội Dung Bài Viết Giới thiệu về phương pháp chưng cất đạm Kjeldahl:Cách xác định ...
Th7
Các Kỹ Thuật Sắc Ký Và Kinh Nghiệm Chọn Sắc Cho Phòng Thí Nghiệm
Sắc ký là khái niệm về hệ số phân vùng giữa hai chất dung môi ...
Th6
Lưu Ý Khi Mua Thiết Bị Phá Mẫu
Máy phá mẫu là một trong những thiết bị quan trọng trong quá trình chưng ...
Th6
LỰA CHỌN ĐẦU DÒ PHÙ HỢP CHO MÁY HPLC
Nội Dung Bài Viết LỰA CHỌN ĐẦU DÒ PHÙ HỢP CHO MÁY HPLCVÌ SAO CẦN ...
Th8